虾饲料胃蛋白酶消化率检测 氨基酸含量检测

虾饲料胃蛋白酶消化率与氨基酸含量检测方法

虾饲料的胃蛋白酶消化率和氨基酸含量是评价其营养质量的关键指标，直接影响虾类的生长性能和饲料利用率。以下是标准检测方法（参考 GB/T 22259-2008、AOAC 988.15 等标准）。

1. 胃蛋白酶消化率（Pepsin Digestibility）检测

（1）定义

• 胃蛋白酶消化率：模拟虾类胃部消化环境，测定饲料中蛋白质在胃蛋白酶作用下的可消化比例（%）。

（2）检测标准

• GB/T 22259-2008：饲料中胃蛋白酶消化率的测定。

• AOAC 988.15：动物饲料蛋白质消化率测定。

（3）试剂与仪器

• 试剂：

• 胃蛋白酶（活性≥1:10,000）

• 0.1 M HCl（pH 1.0~2.0）

• 三氯乙酸（TCA，10%溶液）

• 仪器：

• 恒温水浴振荡器（39±1℃，模拟虾类胃温）

• 离心机（≥4000 rpm）

• 凯氏定氮仪（测定粗蛋白）

（4）操作步骤

1. 样品制备：

• 饲料粉碎过60目筛，取 1.0 g（至0.1 mg）于三角瓶。

2. 酶解反应：

• 加入 50 mL 0.1 M HCl 和 50 mg 胃蛋白酶，39℃振荡4小时。

3. 终止反应：

• 加入 10 mL 10% TCA，静置30分钟沉淀未消化蛋白。

4. 离心过滤：

• 4000 rpm离心10分钟，取上清液用滤纸过滤。

5. 测定氮含量：

• 分别测定 原样总氮（W₁） 和 上清液可溶性氮（W₂）（凯氏定氮法）。

（5）计算消化率

胃蛋白酶消化率(%)=�2�1×100胃蛋白酶消化率(%)=W1W2×100

• 合格标准：优质虾饲料消化率通常≥80%。

2. 氨基酸含量检测

（1）检测方法

（2）酸水解步骤（测总氨基酸）

1. 水解：

• 取 50~100 mg 饲料样品 + 10 mL 6 M HCl，充氮气密封，110℃水解24小时。

2. 定容过滤：

• 冷却后定容至50 mL，过0.22 μm滤膜。

3. 分析检测：

• 使用氨基酸分析仪（如Hitachi L-8900）或HPLC（C18柱）定量。

（3）关键氨基酸指标