微生物菌剂有效活菌数检测 杂菌率 pH值检测

一、 有效活菌数检测

这是Zui关键也是技术性Zui强的检测项目。

1. 核心原理

采用平板计数法（又称稀释涂布法或倾注平板法）。基本原理是将样品进行一系列梯度稀释，使其在固体平板培养基上形成单个、独立的菌落，通过计数菌落数来推算原样品中的活菌数量。

2. 标准依据

• 国家标准：主要遵循 《GB 20287-2006 农用微生物菌剂》 及其引用的方法标准。

• 行业标准：其他特定菌剂可能有行业标准。

3. 检测步骤

1. 样品稀释：

• 称取一定量（如10g）菌剂样品，加入无菌水中（如90mL），充分振荡混匀，此为10⁻¹稀释液。

• 用无菌移液管吸取1mL 10⁻¹稀释液，加入9mL无菌水中，混匀，此为10⁻²稀释液。

• 依此类推，通常稀释至10⁻⁷、10⁻⁸或更高，具体稀释度取决于产品预期的活菌数。

2. 涂布或倾注：

• 涂布法：吸取一定量（如100μL）的特定稀释度菌液，滴加到固体平板培养基上，用无菌涂布棒均匀涂开。

• 倾注法：吸取1mL菌液至无菌培养皿中，倒入融化并冷却至45-50℃的培养基，迅速摇匀。

3. 培养：

• 枯草芽孢杆菌：常用营养琼脂（NA）培养基，30-37℃培养1-2天。

• 胶冻样类芽孢杆菌：常用硅酸盐细菌培养基，28-30℃培养2-3天。

• 根瘤菌：常用酵母膏甘露醇琼脂（YMA）培养基，25-28℃培养3-5天。

• 乳酸菌：常用MRS培养基，37℃厌氧培养2-3天。

• 酵母菌：常用马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基，28℃培养2-3天。

• 将平板倒置放入恒温培养箱中。培养温度和时间完全取决于目标微生物的种类。

• 举例：

4. 计数：

• 选择长出30-300个菌落数的平板进行计数。

• 计算公式：
  有效活菌数 (CFU/g或CFU/mL) = 平均菌落数 × 稀释倍数 × (1/接种量mL) × (1/样品克数)

注意事项：

• 培养基选择性：必须使用适合目标菌生长的选择性或专用培养基。

• 无菌操作：整个过程必须在超净工作台中进行，防止污染。

• 平行实验：每个稀释度需做2-3个平行，以提高准确性。

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