GB/T 19973.1-2023《医疗保健产品灭菌 微生物学方法 第1部分：产品上微生物总数的确定》是中国国家标准，等同采用ISO 11737-1:2018，旨在规范医疗保健产品（如医疗器械、一次性用品等）在灭菌前或灭菌过程中微生物总数的检测方法，为灭菌工艺验证、产品无菌保证及质量控制提供科学依据。以下从标准背景、技术内容、操作要点及行业应用等维度进行详细解析：

标准背景与适用范围

1. 制定目的

• 量化医疗保健产品表面或内部的微生物污染水平，评估灭菌前初始生物负荷（Bioburden）。

• 监测灭菌工艺的有效性（如灭菌后微生物残留量）。

• 支持产品放行决策，确保符合无菌或微生物限度要求。

2. 适用产品

• 直接接触人体的医疗器械：如手术器械、植入物、导管等。

• 一次性医疗用品：如注射器、输液器、敷料等。

• 包装材料：如灭菌包装纸、透气膜等。

• 其他医疗保健相关产品：如牙科材料、实验室设备等。

3. 不适用场景

• 环境微生物监测（如空气、表面清洁度）。

• 特定微生物（如内毒素、支原体）的检测。

• 已灭菌产品的无菌试验（需参考GB/T 14233.2或ISO 11737-2）。

技术原理与核心方法

标准提供两种微生物总数测定方法，需根据产品特性（如材料、结构、污染类型）选择：

1. 方法A：洗涤法（Recovery Efficiency Method）

• 原理：通过特定洗涤液（如磷酸盐缓冲液PBS、生理盐水）冲洗或振荡产品表面，收集微生物后培养计数。

• 适用场景：

• 表面光滑、易清洗的产品（如金属器械、玻璃器皿）。

• 需评估洗涤液回收效率（Recovery Efficiency, RE）时。

• 操作步骤：

• 在已知微生物污染的产品上重复洗涤，计算回收率（RE = 实际回收量 / 初始污染量 × ）。

• RE应≥50%，否则需优化洗涤条件（如增加时间、更换洗涤液）。

• 将产品浸入洗涤液中，通过机械振荡（如涡旋混合器）或超声处理（频率≤40 kHz）辅助微生物脱落。

• 收集洗涤液，过滤或离心浓缩后接种培养基。

1. 预处理：若产品有保护涂层或残留物（如润滑剂），需先去除。

2. 洗涤回收：

3. 回收效率验证：

2. 方法B：直接接触法（Direct Transfer Method）

• 原理：将产品直接接触培养基表面，通过压力或摩擦使微生物转移至培养基，培养后计数。

• 适用场景：

• 表面粗糙、难以清洗的产品（如纺织品、多孔材料）。

• 快速筛查微生物污染水平。

• 操作步骤：

• 统计培养基上菌落形成单位（CFU）数量，结合产品接触面积换算为CFU/cm²或CFU/件。

• 将产品平铺于培养基表面，覆盖无菌薄膜（如聚乙烯膜）后施加压力（如100 g/cm²）或摩擦10秒。

• 移除产品，培养基孵育（30-35℃培养3-7天，需氧菌；20-25℃培养5-7天，真菌）。

• 需根据产品特性选择通用培养基（如胰蛋白胨大豆琼脂TSA）或选择性培养基（如血琼脂平板）。

1. 培养基选择：

2. 接触转移：

3. 结果计算：